DNA亲子鉴定中的PCR技术
作者:华医基因管家
阅读:次2019-12-28
DNA亲子鉴定中的PCR技术: PCR技术常与别的技术结合在一起应用,如RT-PCR、竞争PCR、巢式PCR、RAPf)、ARDRA等。 优势:RT-PCR不但能检验出不可以培养的微生物的基因,还能精确测量mRNA基因的转录水平。 一、反应特性:特异性强PCR反应的特异性决策要素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合 ②碱基配对标准 ③TaqDNA聚合酶生成反应的忠实性 ④靶基因的特异性与单纯性 二、反应标准:标准的PCR反应管理体系: (1)10×扩增缓冲液10ul (2)4种dNTP化合物各200umol/L (3)引物各10~100pmol (4)模板DNA0.1~2ug (5)TaqDNA聚合酶2.5u (6)Mg2+1.5mmol/L (7)加双或三蒸水至100ul PCR反应五因素:参加PCR反应的化学物质关键有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+